Phương pháp sắc ký trao đổi ion

(High Performance Anion Exchange Chromatography with Plused Amperometric Detection)

(Model: Thermo Scientific ™ Dionex ™ ICS-5000)

*

Hệ thống sắc ký kết điều đình ion tính năng cao tại khoa Dinh dưỡng với phụ gia thực phẩm

1. Nguyên ổn tắc

Sắc ký kết là quy trình bóc xẩy ra bên trên cột tách với trộn tĩnh là chất rắn với trộn cồn là hóa học lỏng. Mẫu đối chiếu được đưa lên cột tách dưới dạng dung dịch. Các cấu tử anion tốt cation từ bỏ các thành phần hỗn hợp qua cột sắc ký kết dựa trên ái lực khác biệt giữa những ion đối với trộn tĩnh và pha hễ. Hệ thống dung nhan ký dàn xếp ion tính năng cao rất có thể sử dụng nhằm tách các hóa học so với bị ion hóa vào điều kiện pH cao, bọn chúng di chuyển với tốc độ khác biệt với bóc thoát ra khỏi nhau.

Quy trình phân tích bằng hệ thống IC thường thì vẫn diễn ra nhỏng sau: Mẫu lỏng được chuẩn bị bằng tay hoặc bằng bộ đưa chủng loại tự động. Để so với các cation, chủng loại được bơm qua cột tất cả chứa những hạt vật liệu bằng nhựa mang năng lượng điện âm. Bất kỳ cation nào gồm vào mẫu sẽ bị những phân tử này bảo quản. Sau đó dung môi rửa giải với điện tích dương sẽ tiến hành bơm qua cột với giành địa điểm sửa chữa thay thế những ion dương đã có được lưu lại trước kia. Độ to gan lớn mật yếu ớt của lực link thân các nơi bắt đầu cation cùng với phân tử mang nhựa trong cột dẫn đến thời hạn lưu giữ của từng ion vào cột sẽ khác biệt với trường đoản cú kia có thể phát hiện ra các nơi bắt đầu khác nhau trong và một mẫu mã.

You watching: Phương pháp sắc ký trao đổi ion

Các ion và dung dịch rửa giải đi qua cỗ triệt nhằm hòa hợp điện tích của hóa học rửa giải. Các ion được vạc hiện nay bằng phương pháp áp dụng đầu dò năng lượng điện tích; những biểu hiện được so sánh, cách xử lý đưa đến cỗ ghi thu tài liệu.

Trong so sánh anion, quy trình cũng ra mắt giống như nhưng dung môi cọ giải tích năng lượng điện âm được sử dụng cùng với trộn tĩnh có năng lượng điện dương (phân tử nhựa nhồi cột mang năng lượng điện dương)

*

Sơ đồ gia dụng cấu tạo khối hệ thống HPAEC-PAD

Chế độ PAD (Pulsed Amperometric Detection) vạc hiện hóa học phân tích bằng phương pháp đo dòng năng lượng điện tạo ra vày quá trình oxy chất hóa học so với trên bề mặt của năng lượng điện rất đá quý. Do chỉ phạt hiện tại hầu hết vừa lòng chất gồm đựng nhóm chức hoàn toàn có thể lão hóa ở tầm mức năng lượng điện áp phạt hiện sử dụng buộc phải cách thức mang đến độ nhạy bén tốt nhất có thể trong so sánh nhóm carbohydrate.

2. Ứng dụng hệ thống HPAEC-PAD tại khoa Dinc chăm sóc cùng phụ gia thực phẩm

HPAEC-PAD là chuyên môn được áp dụng vào phân tích carbohydrate thẳng, không bắt buộc dẫn xuất, mang lại độ nhạy bén với độ đúng mực cao.

Với kỹ năng so sánh đa dạng và phong phú nền chủng loại, khoảng tầm mật độ chất đề nghị phân tích rộng lớn (từ bỏ lốt - ppb, ppm - mang lại đa lượng) với độ đúng đắn cao cùng độ tinh lọc cao. Đồng thời, phương thức sắc ký kết ion áp dụng cực kỳ ít các dung môi, Hóa chất ô nhiễm ảnh hưởng xấu mang lại môi trường xung quanh.

- Phân tích nhóm carbohydrate vào thực phẩm: từ bỏ các đội polysaccharide GOS, FOS... đến team mono, di và trisaccharide như lactose, maltose, sucrose…

- Phân tích Inositol vào thực phẩm

- Phân tích các con đường polyol

- Phân tích xơ tổng hợp SDFS


HỆ THỐNG SẮC KÝ LỎNG KHỐI PHỔ HAI LẦN LC-MS/MS

(Model: Waters XEVO TQ-XS)

*

Hệ thống dung nhan ký kết lỏng kân hận phổ hai lần Waters XEVO TQ-XS

Trong thời điểm này, XEVO TQ-XS là hệ thống sản phẩm công nghệ sắc ký kết lỏng khối hận phổ nhị lần nhạy bén độc nhất của hãng sản xuất Waters. Hệ thống bao gồm:

- Sở phận sắc ký lỏng khôn xiết tính năng I-Class

- Sở phận khối phổ ba tứ đọng rất với mối cung cấp ESI và APCI

1. Sở phận nhan sắc ký kết lỏng

Sắc ký là quá trình tách xảy ra bên trên cột tách với trộn tĩnh là chất rắn với pha cồn là hóa học lỏng. Mẫu so với được gửi lên cột tách dưới dạng hỗn hợp. khi thực hiện chạy dung nhan cam kết, những chất so với được phân bố liên tiếp giữa trộn rượu cồn cùng pha tĩnh. Trong các thành phần hỗn hợp các hóa học so sánh, vì chưng kết cấu phân tử với đặc điểm lí hoá của những chất không giống nhau, buộc phải kỹ năng tương tác của bọn chúng cùng với pha tĩnh với trộn rượu cồn khác nhau. Do vậy, bọn chúng dịch rời cùng với vận tốc khác nhau với bóc tách ra khỏi nhau.

*

Mô hình khối hệ thống LC-MS/MS

2. Bộ phận khối hận phổ

Khối hận phổ là sản phẩm công nghệ phân tích dựa vào đại lý xác định khối lượng phân tử của những hợp hóa chất bởi bài toán phân tách các ion phân tử theo tỉ số thân cân nặng cùng năng lượng điện (m/z) của chúng. Các ion rất có thể tạo ra bằng phương pháp thêm hay giảm điện tích của chúng như đào thải electron, proton hóa,... Các ion sản xuất thành này được tách theo tỉ số m/z và phân phát hiện, trường đoản cú đó hoàn toàn có thể cho công bố về trọng lượng hoặc cấu trúc phân tử của hợp chất.

*

Sơ vật dụng cấu tạo của máy khối hận phổ MS

Cấu tạo của một máy khối hận phổ bao hàm 3 phần chính: mối cung cấp ion, lắp thêm đối chiếu cùng bộ phận phân phát hiện nay. Trước không còn, các mẫu được ion hóa vào mối cung cấp ion, tiếp đến chuyển vào bộ phận so sánh kân hận để tách bóc các ion theo tỉ số m/z. Sau đó những ion đi vào thành phần phân phát hiện tại (detector), sẽ tiến hành khuếch đại cùng đưa thành tín hiệu. Các biểu lộ thu được vẫn chuyển vào máy tính xách tay để up load cùng tàng trữ.

Nguồn ion

Chất phân tích sau thời điểm thoát khỏi cột bóc tách sẽ tiến hành dẫn tới nguồn ion nhằm gửi thành dạng hơi cùng được ion hóa nguim tử. Một số kinh nghiệm ion hóa thường được thực hiện trong sắc ký lỏng khối hận phổ như: ion hóa đầu xịt năng lượng điện tử (electrospray ionization – ESI), ion hóa chất hóa học sinh hoạt áp suất khí quyển (atmospheric pressure chemical ionization – APCI).

a) Chế độ ion hóa đầu xịt điện tử (ESI)

Kĩ thuật ion hóa phun điện tử bao hàm ba quá trình cơ phiên bản sau:

+ Tạo thành những giọt có năng lượng điện.

+ Làm giảm size của những phân tử, và phân nhỏ dại các phân tử.

See more: Bộ Cá Voi Đẻ Con Hay Đẻ Trứng Hay Đẻ Con? Sống Ở Đâu

+ Quá trình có mặt pha hơi những ion.

Lúc dung dịch chủng loại ra khỏi cột dung nhan cam kết, được đưa vào ống mao quản ngại bằng sắt kẽm kim loại. Đầu mao quản ngại này được áp điện gắng cao (4-6 kV). Lúc năng lượng điện dư bên trên đầu mao quản thừa qua sức căng mặt phẳng của dịch mẫu thì sẽ tạo thành các giọt có điện tích. Tiếp đó các giọt mang năng lượng điện này được làm giảm kích cỡ nhờ nhì quy trình thường xuyên xảy ra, kia là sự việc hóa khá dung môi nhờ dòng khí N2 được liên tục thổi vào và sự phun phá của những giọt tích năng lượng điện cùng dấu. Cuối thuộc dẫn tới việc có mặt trộn hơi của các ion. Nhờ lực hút ít tĩnh năng lượng điện mà lại các ion này được dẫn vào bộ đối chiếu kân hận phổ qua một cửa sổ vô cùng bé dại. Dung môi cùng khí trơ N2 được hút ra ngoài vày một dòng khí (Curtain Gas).

b) Chế độ ion hoá hoá học làm việc áp suất khí quyển (APCI).

Chất so sánh cùng dung môi sinh hoạt dạng lỏng được chuyển thành các giọt bé dại rồi hóa khá sinh sống nhiệt độ cao khoảng chừng 500°C. Một năng lượng điện thế cao tự 3 – 5kV tạo ra các electrron và ion chất hóa học so sánh.

Hệ thống sắc đẹp ký kết lỏng tính năng cao (HPLC)
*

Các hệ thống sắc cam kết lỏng tính năng cao trên khoa Dinch chăm sóc và phú gia thực phẩm

1. Nguim tắc

Sắc ký kết lỏng là quy trình bóc tách xảy ra bên trên cột tách cùng với pha tĩnh là hóa học rắn và pha cồn là chất lỏng (sắc đẹp ký kết lỏng - rắn). Mẫu đối chiếu được gửi lên cột bóc dưới dạng hỗn hợp. Khi thực hiện chạy dung nhan cam kết, các hóa học so với được phân bố tiếp tục giữa trộn động và pha tĩnh. Trong hỗn hợp các hóa học phân tích, vì chưng kết cấu phân tử cùng đặc thù lí hoá của những hóa học khác nhau, yêu cầu kĩ năng liên can của bọn chúng với pha tĩnh cùng pha cồn khác nhau. Do vậy, chúng di chuyển với vận tốc khác nhau với bóc ra khỏi nhau.

Cấu chế tác của hệ thống HPLC

*

Sơ trang bị cấu trúc khối hệ thống HPLC

Cũng nhỏng toàn bộ những thứ nhan sắc cam kết không giống, thiết bị HPLC rất có thể hình dung bao gồm 3 phần chính:

- Phần đầu vào cấp cho trộn cồn gồm thành phần ước muốn cùng mẫu mã đối chiếu.

- Phần tách: là phần trung gian của hệ sắc đẹp cam kết bao hàm cột bóc tách, thỉnh thoảng tất cả cột trợ giúp.

- Phần phân phát hiện tại với cập nhật số liệu: phần này bao gồm các detector, phần khuếch đại, computer cùng ứng dụng up load số liệu, phần tử ghi bộc lộ.

See more: Sự Khác Biệt Giữa M Etyl Axetat Có Tan Trong Nước Không Tan Trong Nước? A

Pha tĩnh vào HPLC

Trong HPLC, pha tĩnh (stationary phase) chính là hóa học nhồi cột có tác dụng trọng trách bóc tách hỗn hợp hóa học phân tích. Đó là phần nhiều hóa học rắn, xốp cùng form size phân tử cực kỳ nhỏ dại, từ bỏ 3 - 7µm. Tuỳ theo bản chất của pha tĩnh, vào cách thức nhan sắc ký lỏng trộn link thường xuyên chia làm 2 loại: sắc ký trộn thường (NP-HPLC) cùng dung nhan ký pha ngược (RP-HPLC)

Sắc ký pha thường: pha tĩnh có bề mặt là những hóa học phân rất (đó lànhững silica trằn hoặc những silica được đính thêm các nhóm ankyl có không nhiều cacbon với các team chức phân cực: -NH2, -CN...), pha đụng là các dung môi hữu cơ ko phân rất như: n-hexan, toluene…Hệ này có thể tách bóc đa dạng mẫu mã những hóa học không phân cực xuất xắc không nhiều phân cực.

Chuyên mục: Blog